Молекулярно-биологическое подразделение

           ПЦР подразделение клинико-диагностической лаборатории НОКБ им. Семашко занимается проведением исследований, в основе которых лежит метод ПЦР.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод лабораторной диагностики, направленный на выявление возбудителей инфекционных заболеваний.

Метод ПЦР – один из современных и точных методов лабораторной диагностики. Большая точность метода достигается за счет высокой специфичности (99-100%). Так как в исследуемом материале выявляется уникальный фрагмент ДНК или РНК, характерный только для данного возбудителя, что прямо говорит о его присутствии в организме. Затем чужеродный генетический материал многократно копируется в пробирке при помощи ДНК-полимеразы.  Затем миллионные количества копий специфических фрагментов ДНК регистрируются амплификатором в режиме реального времени. ПЦР — диагностика универсальна и тем, что позволяет обнаружить чужеродное ДНК в самых различных биологических тканях — слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток и т. д.
При определении мест забора клинического материала, необходимо учитывать особенности данной инфекции, возможные пути передачи заболевания.

 

Достоинства метода ПЦР

  1. Возможность проводить прямое определение возбудителя (ДНК или РНК) в то время как, метод иммуноферментного анализа дает опосредованное свидетельство наличия инфекции;
  2. Высокая специфичность до 99-100%, которая обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК, отсутствуют перекрестные реакции и т.д.
  3. Высокая чувствительность. Реакция позволяет выявлять единичные клетки бактерий или вирусов, особенно при инфекциях и стадиях заболевания, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых  форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при скрытых и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов.

Важнейшим фактором для проведения ПЦР диагностики является приборное обеспечение. Постановка полимеразной цепной реакции требует наличие специального программируемого оборудования – амплификатора — термоциклера, обеспечивающего периодическое охлаждение и нагревание пробирок. Трехступенчатый цикл, в результате которого получаются точные копии идентифицируемого участка матричной ДНК, повторяется необходимое количество раз (как правило, 30-40 раз) в соответствии с заданной программой термоциклера.

Для проведения ПЦР исследований  подразделение клинико-диагностической лаборатории НОКБ им. Семашко оснащено современным оборудованием :  ДНК- амплификатор iCycler iQ5 (Bio-Rad), амплификатор ДТ прайм «НПО ДНК-технология» Россия.

 Мы проводим следующие исследования методом ПЦР:

  1. Выявление ДНК или РНК возбудителей инфекций, передаваемых половым путем и урогенитальных инфекций.
  2. Исследование флоры урогенитального тракта (Фемофлор)
  3. Выявление, типирование и количественное определение вирусов папилломы человека  высокого и низкого канцерогенного риска.
  4. Диагностика герпес-вирусных инфекций (вирус простого герпеса 1,2 типов, цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барр, Varicella-Zoster virus)
  5. Диагностика вирусных гепатитов
  6. Диагностика онкологических заболеваний: скрининг ХМЛ (хронического миелолейкоза), подтверждение диагноза ХМЛ, мониторинг эффективности лечения.
  7. Определение генетических полиморфизмов, ассоциированных с риском развития наследственных заболеваний (тромбофилия), нарушение метаболизма фолатов и т. д.)
  8. Диагностика причин мужского бесплодия, в основе которого лежит генетический фактор (делеции локуса AZF Y хромосомы, муковисцидоз и т.д.)

HLA-типирование (типирование генов гистосовместимости человека II класса)

Оставьте отзыв об этом отделении